(1)环境净化,使用接种室或接种箱、接种棚进行接种,需提前消毒,使用气溶胶消毒剂,每立方米5-8克,点燃产生气体进行消毒。
(2)菌种预处理,先将菌种瓶口的棉塞取下,用塑料袋将瓶口或袋口包好,然后移入接种室,再用接种铲伸出放入滤瓶袋中,去除表面老化菌膜,挖出。如果底座有白色扭结,应将其挖出,用棉球蘸上75%的酒精,在瓶子内壁周围擦拭,然后移入接种室。如果是袋头拉伤,打开袋口,同样处理拉伤,扭动袋口,移入接种盒进行接种。
(3)接种无菌操作接种环节的无菌操作技术规程主要掌握以下五个方面。
①选择在晴天午夜或清晨接种的时间。此时温度较低,细菌处于休眠状态,有利于提高菌袋接种率。雨天空气湿度大,容易感染霉菌,不宜接种。
②将接种物放入塑料袋中,移至无菌室或接种帐篷后,与细菌、接种工具、酒精灯一起进行第二次灭菌。先用气雾剂吸30分钟以上,接种前40-60分钟,再用紫外线照射30分钟,达到无菌条件。工作人员穿着工作服、帽子、口罩和拖鞋。农场接种人员进房前需洗头、吹干、换上干净衣服。接种前用75%的酒精擦洗双手或戴上乳胶手套。
③接种敏捷袋料,打开袋口,系好绳子,如果是有环的卫生棉条,将卫生棉条拉出。将细菌接种到袋子中,重新系好袋子或卫生棉条以恢复密封。如果瓶子是种植的,去除覆盖瓶口的薄膜,接种后恢复。由于在接种过程中袋子的打开,培养材料暴露在空间中。如果室内消毒不彻底,残留的细菌和孢子很容易被利用。另一方面,接种器具为金属制品,使用时间长了容易燃烧。当细菌通过酒精灯的火焰区域时,如果移动缓慢,很容易将细菌烧毁。
④每批料袋接种后,必须打开门窗通风30-40分钟,然后关闭门窗,继续接种。.如果接种后没有通风,由于室内酒精灯和人体温度的影响,以及接种时开孔,物料中的水分会蒸发,造成高温高湿,容易导致杂菌堆积,势必造成杂菌污染。
⑤清理残留物在接种过程中,细菌培养瓶的覆膜废弃物,特别是工作台和室内场地上的木屑等杂质,必须集中在角落,不得乱扔。每批袋子接种完成后,结合通风,进行一次清洁,保持场地清洁,防止细菌污染。
牛肝菌大棚的温度是多少
在培养基中形成子实体,在pH5-6、温度5℃-20℃的摇瓶培养条件下,90天后首次人工培育牛肝菌子实体。